ГлавнаяО насУказатель диагнозов ОборудованиеПресс-центрФотоархив Контакты

 da28707d4ed7db46acc162c7aa854cbf

Сафанков Валерий Иванович

 врач дерматолог-онколог, кандидат медицинских наук   Узнать больше...

Чумак Д.К.диагностика базально-клеточного рака кожи методом дерматоскопииУдаление невусов (родинок), себорейных кератом, бородавок, папиллом, фибром, ангиомКосметические удаления кожи лица Немеланомные раки кожиавторство

Информация для врачей

   гистология3 Метод патоморфологического исследования.

   Материалом для исследования являются биоптаты опухолевой ткани, которые фиксируют в 10% растворе нейтрального формалина и 96° спирте. Далее удаленный материал заливается парафином, после чего выполняются тонкие, серийные срезы толщиной 5-10 мкм при помощи специальных ножей. Окраска приготовленных срезов проводится гематоксилином и эозином. При необходимости для изучения соединительной ткани проводится окраска пикрофуксином по методу Ван - Гизона, для определения состояния эластических волокон резорцин - фуксином по методу Вейгерта.

   После приготовления и покраски срезов их исследуют в световом микроскопе, используя лупное увеличение в 64, 120, 200, 720 раз.

   Метод иммуногистохимического исследования.

  гистология4 Материалом для иммуногисто- химического исследования служат резецированные участки кожи пациентов с опухолями кожи. Исследуемый материал помещают в нейтральный забуференный 10% раствор формалина (pH 7,4) и фиксируют в течение 24 часов. После дегидратации кусочки заливают в парафин по стандартной методике. На ротационном микротоме Microm HM325 с системой переноса срезов STS изготавливают серийные гистологические срезы толщиной 4 мкм, которые затем окрашивают гематоксилином и эозином по стандартной методике. Иммуногистохимические особенности ангионеогенеза, пролиферативной, апоптической активности и др. исследуют с помощью иммуногистохимической методики. Срезы помещают на покрытые адгезивом стекла Super Frost Plus (Menzel, Германия). Для «демаскирования» антигенов регидратированные срезы подвергают термической обработке в растворе Target Retrieval Solution (DAKO, Дания) с использованием микроволновой печи Samsung CE118KFR. После блокирования неспецифического связывания белков протеиновым блоком (DAKO) и эндогенной пероксидазной активности пероксидазным блоком (DAKO) наносят первичные антитела. Используются мышиные моноклональные антитела. Визуализацию первичных антител проводят с помощью высокочувствительной полимерной системы детекции DAKO Advance. В качестве субстрата для пероксидазы хрена используют DAB+ (DAKO). Препараты докрашивалют гематоксилином Майера. Далее окрашенные срезы заключают в полусинтетическую среду Permanent Mounting Medium (DAKO).

  гистология5 Микроскопию препаратов и морфометрические исследования проводят на микроскопе Olympus AX70 Provis (Olympus, Япония) с помощью программы анализа изображения Analysis 3.2 Pro (Soft Imaging, Германия) согласно рекомендациям производителя программного обеспечения. На панели инструментов с помощью опции Measure выбирается функция Area/Perimeter с дальнейшим измерением площади каждого сосуда (мкм) по позитивно окрашенным эндотелиальным клеткам (коричневый цвет) и определяют суммарную площадь сосудистого русла в каждом отдельном поле зрения. Измерение площади исследуемого поля зрения (мкм) выполняется с помощью вышеописанных опции и функции Measure и Area/Perimeter.

© 2012 Dermatoscopy.in.ua
Все права защищены